再生障碍性贫血的实验诊断

        再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA)是由多种病因、多种发病机制引起的一种骨髓造血功能衰竭症，主要表现为骨髓有核细胞增生低下、全血细胞减少以及由其导致的贫血、出血和感染等。AA分为先天性及获得性。目前认为T淋巴细胞异常活化、功能亢进造成骨髓损伤、造血细胞凋亡和造血功能衰竭在获得性AA发病机制中占主要地位。先天性AA罕见，主要为范可尼贫血（Fanconi anemia)、先天性角化不良、Diamond-Blackfan贫血等。

　　(一）血象

　　以全血细胞减少，网织红细胞绝对值降低为特征。贫血多为正常细胞性，少数为轻、中度大细胞性。网织红细胞绝对值明显减少。各类白细胞都减少，其中以中性粒细胞减少尤为明显，而淋巴细胞比例相对增多。血小板不仅数量减少，而且体积小和颗粒减少。急性再障时，网织红细胞比值低于1%，绝对值低于15×109／L，中性粒细胞常低于5×109／L，血小板低于20×109／L；慢性再障各指标下降，但较急性再障为高。

　　(二）骨髓象

　　多部位穿刺结果均显示三系增生不良或极度不良，有核细胞明显减少。造血细胞（粒系、红系、巨核系细胞）明显减少，早期幼稚细胞减少或不见，特别是巨核细胞减少。无明显的病态造血。非造血细胞（包括淋巴细胞、浆细胞、肥大细胞等）比例增高，大于50%。骨髓小粒中造血细胞极少，大多为非造血细胞或脂肪细胞。

　　(三）造血祖细胞培养

　　血液、骨髓或脐血中的单个核细胞(mononuclear cells，MNC)在适当的造血细胞因子（cytokine，CK)或集落刺激因子(colony stimulating factor，CSF)作用下培养7～14天，可以在半固体琼脂及甲基纤维素等培养体系中生成主要由不同造血细胞组成的集落，称为集落形成单位(colony forming units，CFU)。每个集落可视为由单一细胞增殖、分化而来，集落数的多少可反映一定单个核细胞数量条件下的祖细胞数量及分化、增殖的能力。造血祖细胞包括多向造血祖细胞（colony-forming unit-granulocyte ／erythrocyte ／macrophage ／megakaryocyte，CFU-GEMM)、粒-单系祖细胞（colony-forming unit-granulocyte ／macrophage，CFU-GM)、前祖红细胞(burst forming unit-erythrocyte，BFU-E)、后祖红细胞(colony-forming unit-erythrocyte，CFU-E)和巨核祖细胞（colony-forming unit-megakaryocyte，CFU-Meg)等。

　　【临床意义】

　　（1）粒-单系祖细胞培养：①白血病的辅助诊断、治疗监测与预后判断。白血病时，簇与集落比值和数量异常，疾病缓解后可恢复正常，复发前又出现异常；②按生长类型将骨髓增生异常综合征分二型，Ⅰ型为非白血病生长型，Ⅱ型为白血病生长型，后者易转变为急性非淋巴细胞白血病，且多数生存期短；③再生障碍性贫血多数患者的集落、簇生长均减少，其中CFU-GM数不减少者预后好，缓解病例可见CFU-GM上升；④真性红细胞增多症如伴白细胞增高，则CFU-GM增多；如转变为急性白血病，则CFU-GM减少。

　　（2）红系祖细胞培养：①再生障碍性贫血，BFU-E、CFU-E均减少，以后者更甚，与疾病严重程度一致；②单纯红细胞再生障碍性贫血，CFU-E减少，对红细胞生成素（EPO)反应低下；③急性白血病细胞浸润明显时，CFU-E、BFU-E均减少，对EPO反应低下；④慢性粒细胞性白血病，BFU-E、CFU-E均增高并可分化成熟；⑤真性红细胞增多症，BFU-E、CFU-E均增高，且后者对EPO感受性增强。

　　【评价】

　　造血祖细胞培养不仅有助于包括再生障碍贫血在内的血液系统疾病的诊断和辅助诊断，也有助于了解发病机制和选择治疗方案。

　　(四）红细胞生成素测定

　　红细胞生成素（erythropoietin，EPO)是一种糖蛋白，成人80%～90%的EPO由肾小球旁的成纤维细胞合成，其生理作用是调节红细胞的生成和分化。

　　【临床意义】

　　（1）降低：常见于肾性贫血（肾小球滤过率＜30ml／min时，EPO明显减低）、慢性病性贫血和真性红细胞增多症等。