肿瘤标志物的实验检测

　　肿瘤标志物根据其生物化学特性分为酶类、胚胎抗原、糖蛋白类、蛋白类和激素类。通过检测恶性肿瘤患者外周血中的肿瘤标志物的浓度，可以对肿瘤进行诊断、鉴别诊断、疗效判断、预后判断，监测肿瘤是否复发和转移，为肿瘤的防治提供帮助。

　　一、酶类肿瘤标志物的检测

　　（一）前列腺特异性抗原

　　前列腺特异性抗原（prostate specific antigen，PSA）是在1979年由Wang首先报道的。它是一种由前列腺上皮细胞分泌的蛋白酶，为分子量34000的单链糖蛋白，正常人血清中含量极微。前列腺癌患者的正常腺管结构遭到破坏，可见血清中PSA含量升高。目前，临床上已广泛将其用于前列腺癌的辅助诊断，但良性前列腺疾病时PSA也可轻度升高。血清总PSA（t-PSA）中有60％～90％的PSA与a1抗糜蛋白酶、a2巨球蛋白等各种结合形式存在，称为复合PSA（c-PSA）；5％～40％的PSA以未结合的形式存在，称为游离PSA（f-PSA）。

　　【临床意义】

　　1．前列腺癌患者可见血清PSA升高。以血清t-PSA＞4.0μg／L判断为阳性，则其阳性率为50％～80％。t-PSA的血清浓度和阳性率随病程的进展而增高。前列腺癌手术后，t-PSA浓度可逐渐降至正常，若手术后t-PSA浓度不降或下降后再次升高，应考虑肿瘤转移或复发，因此PSA测定可作为监测前列腺癌病情变化和疗效的重要指标。

　　2．前列腺肥大、前列腺炎、肾脏和泌尿生殖系统的疾病，也可见血清t-PSA和f-PSA水平轻度升高（一般在4.0～10.0μg／L），必须结合直肠指检、超声检查等进行鉴别。

　　3．单独使用t-PSA或f-PSA诊断前列腺癌时并不能排除前列腺肥大对前列腺癌诊断的影响，特别是当t-PSA在4.0～10.0μg／L的灰区时，应用血清中f-PSA／t-PSA比值测定显得更有价值。通常，f-PSA／t-PSA比值＜10％提示前列腺癌，f-PSA／t-PSA比值＞25％提示前列腺增生，其特异性达90％，准确性>80％。

　　4．约有5％的前列腺癌患者的t-PSA浓度正常，但前列腺酸性磷酸酶（PAP）升高。如联合测定两者，可提高前列腺癌的阳性检出率。

　　5．其他恶性肿瘤如肾癌、膀胱癌、肾上腺癌、乳腺癌等，也有不同程度的阳性率。

　　6．采集患者的血标本前若进行导尿或前列腺按摩，可导致血清PSA升高，应注意避免。

　　【评价】

　　1．PSA是筛检前列腺癌的非常有价值的指标，常与直肠指检及经直肠超声检查联合应用于无明显症状的大于50岁的男性。此外，在原发性和转移性前列腺癌患者中，PSA还可以用于疾病的分期以及疗效和病程的监测。

　　2．如PSA检测和直肠指检均为异常，则前列腺癌的阳性预示值达50％，明显高于单独的PSA检测（20％）和直肠指检（10％）。此外，直肠指检出的前列腺癌患者处于进展期的比例高于PSA筛检出的患者。

　　（二）前列腺酸性磷酸酶

　　前列腺酸性磷酸酶（prostatic acid phosphatase，PAP）是前列腺分泌的一种酶，属糖蛋白，分子量102000，在酸性环境中活性最强，能水解有机磷酸酯。1936年Gutmann首次发现前列腺癌骨转移的患者酸性磷酸酶活性升高。与PSA类似，PAP是诊断前列腺癌，监测前列腺癌疗效以及前列腺癌术后是否复发转移的辅助指标。

 　　【临床意义】

　　1．前列腺癌时可见血清PAP浓度升高，特别是在第3、4期的前列腺癌。PAP测定诊断前列腺癌的特异性比PSA高，可达96％，但敏感性较PSA低，约为57％。

　　2．前列腺肥大、前列腺炎和泌尿生殖系统疾病，也可见到PAP升高。

　　3．某些肾脏和前列腺检查可导致血清PAP升高，在判断测定结果时要予以考虑。

　　【评价】

　　PAP肿瘤早期筛查和诊断方面不如PSA敏感，PAP主要应用于转移性前列腺癌和前列腺癌的病理分期有关，联合检测PAP和PSA可提高前列腺癌诊断的阳性率。

　　（三）神经元特异性烯醇化酶

　　神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）是烯醇化酶的一种同工酶，目前认为它是小细胞肺癌（SCLC）和神经母细胞瘤的肿瘤标志物。烯醇化酶同工酶根据α、β、γ三个亚基的不同，可分为αα、ββ、γγ、αβ和αγ五种二聚体同工酶。α亚基主要存在于肝、肾等组织；β亚基主要存在于骨骼肌和心肌；γ亚基主要存在于神经组织。γγ亚基组成的同工酶属神经元和神经内分泌细胞特有，故命名为神经元特异性烯醇化酶，此酶在正常人脑组织中含量最高，起源于神经内分泌细胞的肿瘤组织也异常表达，此外SCLC也是一种能分泌NSE的神经内分泌性质肿瘤。NSE分子量为87000，pH4.7，是一种酸性蛋白酶，参与糖酵解，主要作用是催化磷酸甘油变成烯醇式磷酸丙酮酸。癌肿组织糖酵解作用加强，细胞增殖周期缩短，细胞内的NSE释放进入血液增多，导致此酶在血清内含量增高。NSE也存在于正常红细胞和血小板中，标本溶血会影响测定结果，因此采血时要特别注意避免溶血。