溶组织内阿米巴病的实验诊断

        溶组织内阿米巴(entamoeba histolytica，Schau-dinn，1903)属内阿米巴科的内阿米巴属。1928年，Brumpt曾提出溶组织内阿米巴有两个种，其中一种可引起阿米巴病，而另一种虽与溶组织内阿米巴形态相似、生活史相同，但无致病性，并命名为迪斯帕内阿米巴(entamoeba dispar)。引起阿米巴病的是溶组织内阿米巴，而迪斯帕内阿米巴无致病性。

　　【临床表现】

　　肠阿米巴病病变在结肠，表现为痢疾样症状，易形成慢性，有复发倾向，易发生肝脓肿等并发症。

　　【实验诊断】

　　实验诊断主要包括病原学诊断（包括核酸诊断）、血清学诊断和肠镜活组织检测或刮拭物涂片检测。

　　一、粪便检测

　　粪便外观呈暗红色果酱样，腥臭，粪质较少，含血及黏液。

　　1．直接涂片法  对肠阿米巴病而言，粪检仍为最有效的手段。这种方法可以检出活动的滋养体，应选择新鲜带脓、血和黏液部分的粪便直接涂片。但由于虫体在受到尿液、水等作用后会迅速死亡，故应注意快速检测、保持25～30℃以上的温度和防止尿液等污染，但要注意某些抗生素、致泻药或收敛药、灌肠液等均可影响虫体的生存和活动，从而影响检出率。对脓肿穿刺液等亦可行涂片检测，但应注意虫体多在脓肿壁上，故穿刺和检测时应予注意。另外，镜下滋养体需与宿主组织细胞鉴别，鉴别要点为：①溶组织内阿米巴滋养体大于宿主细胞；②胞核与胞质大小比例小于宿主细胞；③滋养体为泡状核，核仁居中，核周染色质粒清晰；④滋养体胞质中可含红细胞和组织碎片。

　　2．碘液染色法  此法为检测包囊的常用方法。由于包囊自粪便中排出时具有间歇性的特点，在粪便中分布不均，检出率常受影响，因而每份粪便标本应作三张涂片较为准确。必要时可连续检测3次。

　　3．离心浓集法  慢性患者或带包囊者粪便中包囊少，直接生理盐水涂片法不易发现，利用比重高的饱和硫酸锌溶液，可使包囊浮聚于液面，以达浓集的目的。此法检出率高，为防止包囊变形，操作完毕应立即镜检。

　　4．离心沉淀法  本法对痢疾阿米巴具有杀死、固定、染色、防腐的作用。可以用于检测包囊，亦可检测滋养体。

　　5．铁苏木精染色法  此法能使滋养体和包囊结构清晰可见，是虫种鉴定和鉴别的常用方法。

　　【评价】

　　形态学检测中需要连续、多次，以及采取浓缩、染色等方法，提高检出效率。

　　二、分离培养

　　培养法在诊断和保存虫种方面有重要意义，且比涂片法敏感。培养物常为粪便或脓肿抽出物。用Robinson氏培养基，对亚急性或慢性病例检出率比较高。

　　【评价】

　　由于培养所需条件复杂，受多种因素影响，故此法不宜作为阿米巴病的常规检测。

　　三、活组织检测

　　用乙状结肠镜或直肠镜在直接观察黏膜溃疡时，从溃疡边缘或深层取活组织涂片检测，检出率高。同样，肝、肺阿米巴病时，可分别取肝穿刺液或痰液作生理盐水直接涂片检测。上述病原检测要特别注意盛器洁净及病人服药和治疗措施的影响。某些抗生素，杀虫药物，泻剂、收敛剂，高、低渗灌肠液，钡餐以及自身尿液污染均可使滋养体致死而干扰病原体的检出。

　　【评价】

　　形态学检测中需要连续、多次，以及采取浓缩、染色等方法，提高检出效率。

　　四、免疫学诊断

　　自从阿米巴无共生物培养建立和特异单克隆抗体问世，提供了溶组织内阿米巴纯抗原和优质工具抗体，国内外陆续发展了多种免疫诊断方法。近年以酶联免疫吸附试验(ELISA)的各种改良法应用较多。因此血清学诊断仅对急性发病患者有较大的辅助诊断价值，而且在流行病学调查中，可用于人群抗体滴度的消长水平来提示地区发病情况。单克隆抗体和DNA探针杂交技术的应用为探测宿主血液和排泄物中的病原物质提供了特异、灵敏并能抗干扰的示踪工具。