棘球蚴病的实验诊断

        棘球蚴病(hydatid disease，hydatidosis，echino-coccosis)又称包虫病，是人摄入棘球绦虫卵受染，其在体内多种器官内发育成幼虫而致病。棘球绦虫分细粒棘球绦虫(echinococcus granulosus，Rg)和多房棘球绦虫(echinococcus multilocularis，Em)，它们分别引起两种不同的临床类型，前者为囊肿型棘球蚴病，后者为三色型棘球蚴病。呈世界性分布，是种严重危害人类健康和畜牧业和生产的人畜共患疾病。由于该病的症状和体征千变万化，故靠临床诊断有一定的困难。而实验诊断不仅可以用于初次诊断，而且可以用于手术后或药物诊疗后病者的随访。

　　【临床表现】

　　患者以儿童和青壮年居多，病程较长，其主要危害为压迫所寄生的脏器、破坏周围的组织和毒性作用。患者早期可无任何临床症状，多在体检中发现。主要的临床表现为棘球蚴囊占位所致压迫、刺激或破裂引起的一系列症状。囊型包虫病可发生在全身多个脏器，以肝、肺多见。泡型包虫病原发病灶几乎都位于肝脏，就诊病人多属晚期。一旦棘球蚴囊破裂，可引起继发性感染性休克，甚至死亡。已成为我国乃至世界的危害严重的寄生虫病。

　　【实验诊断】

　　一、皮内试验

　　皮内试验(IDT)是用手术获得透明的包囊液，滤去头节，高压灭菌后作为抗原。一般用1／100生理盐水稀释液0.2ml作皮内注射，形成0.3～0.5cm直径的皮丘，15min后观察结果。皮丘扩大或红晕直径超过2cm者为阳性。有的在注射6～24h后才出现阳性反应，称延迟反应，仍有诊断价值。

　　【评价】

　　本法阳性率可达90%～93%，操作简便，敏感性高，但特异性较差，抗原标准化难度较大，假阳性多见于癌症、结核、肾病、蠕虫病，尤其各种绦虫病。专业病人手术后长时期内仍可保持阳性反应。因此本法不宜作为诊断依据，可在传染病学调查中作筛查用。

　　二、间接血凝试验

　　间接血凝试验(IHA)是用棘球蚴囊液抗原致敏的红细胞经戊二醇醛化，再经鞣酸鞣化用于查棘球蚴病。此法优于新鲜的红细胞，致敏的红细胞可在4℃保持其诊断效力达15～18个月。

　　【评价】

　　该方法廉价快速，可用于大量血清样本检测。比酶联免疫吸附试验(ELISA)和乳胶凝集试验(LAT)更有免疫诊断价值，为提高临床确诊率，可以与ELISA和LAT联合使用。当它的最低诊断效价为1︰400时，它的特异住可增加20%，而敏感性反下降1.4%。当阳性结果的效价达到1︰320时，实验的敏感性和特异性分别为88%和98.4%；效价达160时，其敏感性和特异性甚至可达到94.0%、95.1%。

　　三、酶联免疫吸附试验

　　酶联免疫吸附试验(ELISA)是利用已知抗原或抗体，定性或定量定特异性抗体或抗原，按照显色反应的速率和强度与被测样品的抗体或抗原量呈正相关来分析结果，具有双量功能的酶结合物既参与高特异性的免疫反应，又起着生物放大作用，使试验获得高度的敏感性和特异性。

　　【评价】

　　测定总IgG及各种抗体亚基可提高诊断特异性。比如用ELISA测定人IgG、IgG2、IgG3和IgG4对细粒棘球蚴原球节抗原的免疫反应，101例确诊的细粒棘球蚴病人中发现总IgG阳性为83%、IgG4阳性为14%，IgG2和IgG3为阴性。血清、唾液、尿液样品的敏感性分别为72%，56%和84%。间接ELISA利用酶标记的抗体与棘球蚴抗原结合具有很强的诊断价值。纯化的EG95重组蛋白建立间接ELISA，检测新疆的70份阳性血清和70份阴性血清，结果表明该法与新西兰Wallaceville幼物研究中心提供的间接ELISA法符合率为100%．阻断试验结果显示与其他蛋白无交叉反应，批内变异系数介于3.8%～5.6%，批间变异参数介于5.7%～8.4%，结果表明该法特异性强、敏感性高、重复性好。金黄色葡萄球菌白蛋白酶联免疫吸附试验(SPA-ELISA)过氧化物酶标记SPA取代酶标第二抗体并升高孵育温度(41℃)，缩短时间，快速检测101例包虫病人血清，验证阳性率为85.15%，特异性为100%。